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本制品为为采用电子重构架技术重组表达的RNase Inhibitor，可高效的与RNase A/B/C形成1∶1的复合物，从而抑制其活性，保护RNA免受降解。

• 抗氧化/抗巯基类性能的提升，在0～10mM DTT浓度下，活性无明显差异，因此不仅适用于PCR，也可适用于转录等高浓度DTT体系。
  
• 亲和力得到明显提升，在特定条件下可以完全抑制RNase，从而长效保护体系中的RNA分子。
  
• 耐热性显著提高，在55℃条件下加热10min后，仍然保留90%以上活性。65℃加热10min可使其失活。

• cDNA合成反应。
  
• 体外无细胞系统转录或翻译。
  
• 提高多聚核糖体的产量和活性。

• 按以下组分配制反应体系
  

  成分	用量
  MLV反转录酶	0.5～1μL
  10×RT Buffer	2μL
  dNTP Mixture (10mM each)	1μL
  Total RNA or Poly(A) RNA	0.1～2μg
  20×Oligo dT(25)&Random Primer	1μL
  RNase Inhibitor(40U/μL)	0.5μL
  RNase-Free H2O	至20μL

  • Oligo dT(15)使用浓度为20～50μM，如使用Random9随机引物可使用125μM，基因特异性引物可使用5μM。
• 在PCR仪上按下列条件进行反转录反应
  

  温度	时间
  30℃	15min
  55℃	30～60min
  85℃	10min
  4℃

• 反转录所得的cDNA可直接用于PCR反应或储存于-20℃。

图1．RNase Inhibtor对RNaseA高亲和力抑制效应 在25μL体系中加入40U的RNase Inhibtor，并加入5～80ng的RNase A，在5min和20min后读取体系中RNA分子的降解情况来评估RNaseA释放到反应体系的量。抑制率指：与对照组相比（无RI组），反应体系中RNaseA被RI结合的蛋白量。结果显示在20ng的RNaseA条件下，40U的RI在20min时保护率接近完全抑制（100%抑制率），在高度污染的体系中（80ng的RNaseA），20min内的保护率>90%。	图2．氧化和还原条件下RNase Inhibitor的表现 在25μL体系中加入40U的RNase Inhibitor、80ng的RNaseA，并加入0～10mM的DTT，10min后读取体系中RNA分子的降解情况，来评估RNaseA释放到反应体系的量，结果显示该酶对氧化和还原条件不敏感，在所有条件下提供>95%的保护率。
图3．RNase Inhibitor耐热性测试 在25μL体系中加入40U的RNase Inhibitor，在45℃、55℃、65℃加热10min后，再加入RNase A，以检测RNase Inhibitor的失活情况。100%标示与未加热的RT组比较，RNase Inhibitor的活性残留情况，结果显示该酶在55℃加热10min后仍然保留>90%的活性，65℃加热10min后该完全失活。